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小鼠細(xì)胞
- 小鼠骨髓淋巴母細(xì)胞;32D clone3
- 恒遠(yuǎn)生物致力于建設(shè)國內(nèi)最大、種類最全的細(xì)胞與微生物標(biāo)準(zhǔn)制品資源庫，為大學(xué)、科研機構(gòu)及生物醫(yī)藥研發(fā)企業(yè)提供高質(zhì)量、可回溯、品控可靠的生物制品。主要包括原代細(xì)胞及通用細(xì)胞株、細(xì)胞培養(yǎng)周邊試劑、微生物標(biāo)準(zhǔn)品等產(chǎn)品的開發(fā)、生產(chǎn)、儲存和銷售。歡迎來電咨詢！
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細(xì)胞名稱
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32D clone3小鼠骨髓淋巴母細(xì)胞
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細(xì)胞別稱
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32D clone3
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商品貨號
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HYCC20119
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種屬來源
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小鼠
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組織來源
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骨髓
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生長特性
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半貼半懸
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細(xì)胞形態(tài)
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淋巴母細(xì)胞樣
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細(xì)胞規(guī)格
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1×10^6cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
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支原體檢測
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無
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培養(yǎng)基
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RPMI1640+10%FBS+1ng/mlIL3+1%Anti-Anti
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培養(yǎng)條件
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氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
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凍存條件
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無血清凍存液，液氮儲存
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倍增時間
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~24-30小時
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常溫細(xì)胞收貨后處理方法
1. 收到細(xì)胞后，首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)基外溢、渾濁等現(xiàn)象，請及時拍照并與我們聯(lián)系。
2. 用 75%酒精對培養(yǎng)瓶表面進行消毒處理，將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4 h，以恢復(fù)細(xì)胞狀態(tài)。
3. 靜置完成后，取出培養(yǎng)瓶，顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)。如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞異常請及時與我們聯(lián)系，如果細(xì)胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系，則默認(rèn)為收貨良好。
4. 若細(xì)胞密度超過 80%，則可以根據(jù)提供的細(xì)胞培養(yǎng)步驟進行傳代或凍存；若細(xì)胞密度未達到80%，收集瓶中完全培養(yǎng)基，留 6mL 培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a) 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b) 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。
c) 輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
d) 將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代注意點：
l 一定要PBS洗一遍。
l 細(xì)胞多觀察幾次掌握時間，不要在細(xì)胞沒有基本脫落就終止消化然后吹打下來，這樣細(xì)胞 更容易分化和死亡。
l 不要一直對細(xì)胞吹打
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a) 收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b) 根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度1×10^6~1×10^7/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c) 將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
GC-1 spg;小鼠精原細(xì)胞系
STC-1 小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞系
C17.2 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
ASMC 小鼠氣道平滑肌細(xì)胞
MAEC 小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞
MLO-Y4 小鼠骨樣細(xì)胞
MA-891 小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
SVEC4-10 小鼠淋巴結(jié)上皮細(xì)胞
OKT 11 小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞
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